系统性红斑狼疮患者临床免疫指标分析
中华皮肤科杂志1998年第5期第31卷论著摘要作者：邓安梅仲人前张玲珍屠小卿孔宪涛单位：200003上海第二军医大学长征医院全军临床免疫中心系统性红斑狼疮(SLE)是常见的多系统损害自身免疫性结缔组织病，其病因和发病机理尚未完全阐明，可能与免疫系统调节功能紊乱有关。我们采用流式细胞技术和酶联检测技术，分析SLE患者细胞免疫和体液免疫功能，并探讨临床免疫指标在发病机理中的意义。一、临床资料研究对象：按美国风湿病学会1982年制定的SLE诊断标准确诊的SLE患者40例，平均年龄38岁，均为女性。正常对照组40例，取自健康献血员，均为女性，平均年龄32岁。二、实验方法(一)细胞免疫指标测定：于反应管中加入FITC标记的抗CD2、CD3、CD4、CD8、CD16、CD19、CD45RA和CD29抗体，再加入全血100μl，于漩涡振荡器上混匀，室温下孵育20分钟，在Immuno-Proper仪上进行红细胞处理，标本在8小时内上流式细胞仪检测完毕。每一标本设阴性对照。(二)体液免疫指标测定：取血后6小时内留取血清分装冻存于-20℃备用，血清避免反复冻融。冻干马抗人IgG、IgA、IgM、C3、C4血清复溶后用40g/LPEG6000稀释液按标定效价稀释，放置30分钟后用0.45μm滤膜抽滤，滤过液备用，生理盐水(用0.45μm滤膜抽滤)、未冻干的定值标准血清和患者血清用酶联检测仪经免疫比浊法测C3、C4，散射速率比浊法测IgG、IgA、IgM［1］。(三)统计学方法：实验数据以±s表示，采用t检验进行统计分析。三、结果(一)SLE患者与对照组相比，SLE患者CD2+、CD8+、CD19+、CD29+、CD16+(NK)、CD44+细胞及血清中IgG、IgA均显著增加(P＜0.01)，CD3+、CD4+、CD45RA+和T细胞表面TCR含量及血清C3、C4均明显降低(P＜0.01)，CD4+/CD8+倒置(P＜0.01)。SLE患者血清IgG、IgA、IgM显著增高(P＜0.01)，而C3、C4下降(P＜0.01)。见表1和表2。表1SLE患者免疫细胞表面标志分析(单位：%)表面标志例数CD2+CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+正常人4077.46±6.2765.86±4.6037.53±4.9128.01±3.131.25±0.41SLE4087.31±5.4259.22±5.5726.22±3.7536.88±4.230.72±0.25t值-7.5175.81311.5788.4476.979P值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01表面标志例数CD16+(NK)TCRCD19+CD44+CD45RA+CD29+正常人405.31±1.3270.14±5.2312.20±2.5134.93±3.0445.43±5.2131.31±3.64SLE408.25±1.4527.52±3.3419.71±2.2458.55±4.5224.32±4.2645.42±4.71t值-9.48343.43714.11927.42419.83813.397P值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01表2SLE患者体液免疫指标分析指标例数IgG(g/L)IgM(mg/L)IgA(mg/L)C3(mg/L)C4(mg/L)正常人4013.27±3.281180±4301450±2701470±230650±210SLE4024.93±4.092220±5602780±410930±310290±90t值-14.0669.31617.13412.7709.965P值-＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01(二)ANA(+)组(18例)与ANA(-)组(22例)比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P＜0.05)，细胞免疫状态无显著性差异(P＞0.05)。(三)3例活动期SLE患者经临床治疗后，症状、体征好转，其临床免疫指标如CD4+、CD8+、IgG也趋向正常(P＞0.05)。四、讨论本研究结果表明，SLE患者外周血淋巴细胞CD2的水平较正常人明显升高(P＜0.01)，与张泽松［2］等报道的自身免疫病患者T细胞CD2mRNA水平明显增高一致。CD3是成熟T淋巴细胞标志，它与T细胞抗原受体TCR特异性结合形成TCR/CD3复合物，在识别特异性抗原和信号传递中起关键作用。本文结果显示，CD3和TCR在SLE患者中明显低于正常(P＜0.01)。可能是由于患者体内T细胞功能失衡，正常成熟的T细胞消耗过多而未能及时补偿所致。CD4和CD8是成熟T细胞亚群的标志，分别与MHCⅡ类和Ⅰ类抗原结合，不仅可增强T淋巴细胞与抗原递呈细胞或靶细胞结合的程度，而且与刺激信号的传递有关。有人认为SLE患者CD4+/CD8+细胞比例失调，主要是由于CD4+细胞增多或CD8+细胞减少造成［3］，并因此认为是由于CD8+(Ts)细胞减少和功能缺陷引起免疫功能亢进，从而导致自身免疫损伤。而本文结果表明SLE患者外周血CD8+细胞增多，而CD4+/CD8+细胞比值反而显著降低，甚至倒置。可能的解释是CD8+细胞数目虽然增多，但其功能发生改变导致免疫失衡。CD45RA+和CD29+可将CD4+T细胞分为不同的亚群，CD45RA+为抑制诱导T细胞，主要功能是诱导T8+细胞发挥抑制功能，而CD29+是辅助诱导T细胞，主要功能是辅助B细胞产生抗体［4，5］。CD45RA+是人幼稚T细胞标志，本文结果表明，SLE患者CD45RA+减少(P＜0.01)，CD29+T细胞增多(P＜0.01)，可能与T8+细胞抑制亚群减少、辅助细胞与抑制细胞比例失调有关。本文还发现，SLE患者IgG、IgA、IgM均增高(P＜0.01)，而C3、C4降低(P＜0.01)，反映了SLE患者有体液免疫亢进，又有非特异性免疫功能紊乱，C3、C4的降低可能是由于消耗太多所致。ANA(+)组与ANA(-)组比较表明，ANA(+)组体液免疫状态较为亢进(P＜0.05)，细胞免疫状态无显著差异(P＞0.05)。3例活动期SLE患者经临床治疗后，症状体征好转，其临床免疫指标也趋向正常。参考文献1金伯泉.白细胞分化抗原.见:金伯泉主编.细胞和分子免疫学.第1版.西安:世界图书出版社,1995.1-32.2张泽松,许成素,刘士廉,等.自身免疫性疾病患者T细胞表面抗原CD2、CD4和CD8mRNA的表达.中国免疫学杂志,1995,11∶303-306.3徐文玉.SLE免疫调节功能紊乱的机理——T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作用.上海免疫学杂志,1992,12∶253-256.4MorimotoC,LetvinNL,BoybAW,etal.TheisolationandcharacterizationofthehumanhelperinducerTcellsubset.JImmunol,1985,134∶3762-3770.5MorimotoC,LetvinNL,DistasoJA,etal.TheisolationandcharaterizationofthehumansuppressorinducerTcellsubset.JImmunol,1985,134∶1508-1515.（责任编辑：zxwq）
